溶血严重时尿色变深
药物诱发溶血性贫血的实验室检查包括一般检查和g6pd缺乏的过筛试验
(1)一般检查
患者不发生溶血和贫血时,血象正常,红细胞形态和渗透脆性试验均正常急性溶血发生时,血红蛋白和红细胞计数急剧下降,网织红细胞计数升高,可出现多染性及嗜碱点彩细胞贫血严重时白细胞计数和中性粒细胞百分数可增高在溶血刚开始和开始后不久,外周血中有很多含有heinz小体的红细胞这种小体在普通wright染色的血片中不能见到,须将活细胞用甲紫染色或在位相显微镜下才能看到这种红细胞很快被脾脏从外周血中清除出去但脾已切除的病人血液中可出现较多含heinz小体的红细胞溶血严重时尿色变深,潜血试验阳性尿内尿胆原的排泄增多血清胆红素可增高
(2)g6pd缺乏的过筛试验
g6pd缺乏的过筛试验是根据g6pd缺乏时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nadph)生成减少这一原理,以揭示磷酸己糖旁路(hmp)的代谢缺陷,所以对g6pd缺乏的特异性较高,对临床诊断有重要意义临床常用的有以下五种
①荧火点试验:nadph在长波紫外光照射下能发出荧光g6pd缺乏时由于nadph生成减少,故荧光微弱或不显最好有一、二个正常血样本同时检查,用作比较此方法的优点是敏感性和特异性较高,方法简便快捷,但须有一定的条件设备
②抗坏血酸—氰化物试验:主要利用抗坏血酸钠在氧合血红蛋白存在的情况下能生成过氧化氢(h2o2),同时氰化物对过氧化氢酶的抑制作用,以保证生成的h2o2不受破坏,从而使h2o2与还原型谷胱甘肽(gsh)发生特异反应缺乏g6pd的红细胞由于nadph生成减少而影响了gsh 的生成,因而不能防止血红蛋白被h2o2氧化成高铁血红蛋白而变成棕色这种颜色的改变,肉眼即能观察到如红细胞不缺乏g6pd,则有足够的gsh活性使h2o2还原而失效,血液仍呈鲜红色(氧合血红蛋白)这种试验敏感度较高,操作简易省时
③高铁血红蛋白还原试验:主要利用亚硝酸钠的氧化作用,使正常的血红蛋白转变成高铁血红蛋白,同时以美蓝的递氢作用加强磷酸己糖旁路(hmp)的糖代谢当红细胞内g6pd含量和功能正常时,由hmp旁路生成的nadph可作为高铁血红蛋白还原酶的辅酶,并在美蓝的参与下使高铁血红蛋白还原成亚铁血红蛋白当g6pd缺乏时,由于不能生成足够量的nadph,高铁血红蛋白的还原速率减慢,血流呈现棕褐色正常人的高铁血红蛋白还原率在78%以上,中间值78%～4 1%表示g6pd缺乏的杂合子状态,40%及以下表示男性半合子或女性纯合子状态此法操作简便,结果基本可靠;缺点是特异性稍差,可出现假阳性结果
④血片洗脱染色法:其原理与高铁血红蛋白还原试验相同当红细胞内血红蛋白被氧化成高铁血红蛋白后,加入氰化钾使形成氰化高铁血红蛋白,这种血红蛋白易被h2o2洗脱,血片经苏木素伊红染色后,表现为不被染色的红细胞残影正常人的残影红细胞不到2%,g6pd显著缺乏时可超过80 %,女性杂合子20%～79%该法采血量很小,可用于婴幼儿检查和人群的普查工作
⑤四唑氮蓝(nbt)试验:nadph通过甲基吩嗪甲硫酸盐的递氢作用,能使黄色的nbt还原成紫色g6pd缺乏者,由于nadph生成减少,nbt的还原作用减弱或不能还原,结果呈红色或极轻微紫色一种简便的方法是将血液滴在滤纸片上,滴上试剂,在37℃避光放置30分钟,即能显色此法所得结果与标准的g6pd活性定量测定法比较,符合率很高,而操作简便,极适合于普查工作